Para resolver os problemas do sistema de observação de nematoides Caenorhabditis elegans em movimento livre, como campo visual único e dados de movimento influenciados pelo ambiente, foi projetado um sistema de observação de nematoides com dupla via óptica para movimento livre. Este sistema integra um módulo de imagem microscópica e um módulo de imagem de campo amplo, podendo adquirir simultaneamente imagens microscópicas dos nematoides e imagens das placas de cultivo, e por meio da troca do módulo de fluorescência satisfaz as necessidades de aquisição de imagens fluorescentes dos nematoides. O módulo de imagem microscópica é montado diretamente em uma plataforma de deslocamento XYZ de três eixos, o que pode evitar efetivamente as respostas de fuga dos nematoides causadas por vibrações. Por fim, o sistema foi utilizado para imagiar a placa de resolução USAF1951 e nematoides de diferentes linhagens. Os resultados experimentais mostraram que a resolução do módulo de imagem microscópica é menor que 2,19 μm, alcançando imageamento em nível celular dos nematoides. As imagens microscópicas em campo claro mostram claramente a distribuição dos órgãos e contornos celulares dos nematoides, enquanto as imagens fluorescentes mostram claramente a distribuição de diferentes proteínas fluorescentes. O módulo de imagem de campo amplo oferece iluminação uniforme e imagens nítidas, e, por meio de algoritmos morfológicos para processar as imagens, pode-se coletar dados do comportamento de movimento da população de nematoides. Em resumo, este sistema atende às diferentes necessidades de observação dos nematoides, possui boa estabilidade e precisão de dados, aumenta significativamente a flexibilidade dos experimentos com nematoides e fornece uma base para a integração das informações de observação dos nematoides em diferentes escalas.

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